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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠直腸黏膜上皮細胞

產(chǎn)品簡介:

小鼠直腸黏膜上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠小腸隱窩上皮細胞 兔骨髓單核細胞 鋅指蛋白ZBTB38抗體 人彌漫性大B細胞淋巴瘤;TMD8 眼發(fā)育相關(guān)基因蛋白ODAG抗體 小鼠表皮角化細胞 FGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體 SBC-2(人小細胞肺癌細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1185

更新時間:2024-11-07

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠直腸黏膜上皮細胞

小鼠直腸黏膜上皮細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

直腸

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

上皮細胞樣

YS-01X8546

細胞簡介:

小鼠直腸黏膜上皮分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以門而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細接管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的小鼠直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):上皮細胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠直腸黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠直腸黏膜上皮細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠直腸黏膜上皮細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

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小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒   小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒      小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶試劑盒、小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶eisa試劑盒

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纖維母細胞生長因子4抗體

GLIS1蛋白抗體

IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原

USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein

CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標簽)

TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋僀

DNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依賴蛋白激酶催化亞基多肽抗原

CSAG1 Protein Human 重組人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 標簽)

IL4R重組大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白

USP5重組人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein

小鼠前列腺素F(PGF)ELISA pcr檢測試劑盒

Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗復合物(TAT)試劑盒

HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)pcr檢測試劑盒分裝

GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母細胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10

MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠直腸黏膜上皮細胞大鼠細胞間粘附分子2(ICAM2)試劑盒 ,英文名: ICAM2 ELISA Kit

Mouse somatostatin (SS) ELISA Kit 小鼠(SS)試劑盒

MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 小鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHSP-40(HumanHeatShockProtein40)ELISAKit人熱休克蛋白40

細胞MAPKAPKINASE3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitIL-17大鼠白介素17


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