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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

小鼠氣管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

小鼠氣管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體 葡萄糖果糖還原酶2抗體 甲狀腺激素受體相互作用12抗體 小鼠軟骨細(xì)胞 大鼠胚胎成纖維細(xì)胞 脾細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞;TE4 人肥大細(xì)胞;HMC-1

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1216

更新時(shí)間:2024-11-04

產(chǎn)品特性Product characteristics

小鼠氣管上皮細(xì)胞

小鼠氣管上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

氣管

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7012

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠氣管上皮分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠氣管上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶   英文名稱:   Angiotensin Conveing Enzyme   規(guī)格:      英文縮寫:   ACE

膜聯(lián)蛋白2   英文名稱:   Annexin 2   規(guī)格:      英文縮寫:   ANXA-2

骨堿性0酸酶   英文名稱:   bone alkaline phosphatase   規(guī)格:      英文縮寫:   BALP

凋亡因子BAX   英文名稱:   apoptogen BAX   規(guī)格:      英文縮寫:   BAX

小鼠抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granulysin (granulysin) ELISA Kit 人顆粒溶素(granulysin)試劑盒

HumanGasinELISAKit 人胃泌素(Gasin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor6-K-PGELISAKit大鼠6同前列腺素

飲料D-蘋果酸比色法定量試劑盒20

MousemammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit小鼠癌標(biāo)志物-CA153試劑盒規(guī)格:96T/48T

NACAD蛋白抗體

FITC標(biāo)記小鼠CD122單克隆抗體

CPM重組小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白 Protein

β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白 Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)

PRTFDC1重組人 PRTFDC1 蛋白 Protein

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白

CD63 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白

肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白

BGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白

PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein

小鼠氣管上皮細(xì)胞大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)試劑盒 ,英文名: RPA1 ELISA Kit

Porcine methemoglobin (MHB) ELISA Kit 豬高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMBP(Mousemyelinbasicprotein)ELISAKit小鼠髓0脂堿性蛋白

體液氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50

ELISAKitLp-PL-A2脂蛋脂酶A2

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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