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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：Minibrain 抗體 B淋巴細(xì)胞生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體 GBT1蛋白抗體 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 CHO-K1中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞k1 亞克隆系 U-937 人淋巴瘤細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：106
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脈絡(luò)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7397 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮分離自眼球脈絡(luò)膜組織；脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細(xì)胞，對(duì)外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當(dāng)眼球受到從前面來(lái)的外力的沖擊作用通過(guò)玻璃體傳到后極部時(shí)，堅(jiān)硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時(shí)對(duì)視覺(jué)系統(tǒng)起保護(hù)作用，對(duì)整個(gè)視覺(jué)神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細(xì)胞，有營(yíng)養(yǎng)和遮光作用。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 96T/48T
小鼠乙酰(ACH)試劑盒 96T/48T
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒 96T/48T
小鼠胰高血糖素（GC）試劑盒 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human leukocyte aigen B27 (HLA-B27) ELISA Kit 人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒
Humanβ-glucuronidase,βGDELISAKit 人β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor破傷風(fēng)抗體(雙抗原夾心法)
營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑L-天酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
Mouseierleukin10,IL-10ELISAKit小鼠白介素10(IL-10)試劑盒規(guī)格：96T/48T
FAM161B蛋白抗體
aFGF胞內(nèi)結(jié)合蛋白抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198 1mgphospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α1抗原
GBA3重組人 GBA3 / CBGL1 蛋白 Protein
CD3E & CD3G Protein Human 重組人 CD3E & CD3G Heterodimer 蛋白
COMP Protein Human 重組人 COMP 蛋白
phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198 1mgphospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α1抗原
CD3E & CD3G Protein Human 重組人 CD3E & CD3G Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
COMP Protein Human 重組人 COMP 蛋白
GBA3重組人 GBA3 / CBGL1 蛋白 Protein
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠肝素結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)試劑盒 ，英文名： HBEGF ELISA Kit
Porcine compleme 3 (C3) ELISA Kit 豬補(bǔ)體蛋白3(C3)試劑盒
難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMCV(Humanai-myelinaibodyIgA)ELISAKit人抗突變型瓜波形蛋白抗體
體液人體鼻病毒(rhinovirus)定性試劑盒20次
ELISAKitIL-2R牛白介素2受體
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
