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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠骺軟骨細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
生長(zhǎng)板組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7531 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠骺軟骨分離自骨骺生長(zhǎng)板;骨骺生長(zhǎng)板位于長(zhǎng)骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細(xì)胞可分裂、成熟、肥大,最終被骨組織所替換,對(duì)于長(zhǎng)骨生長(zhǎng)具有重要作用。幼稚的骺軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層,單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形,長(zhǎng)軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形,染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些骺軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,骺軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骺軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化并軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骺軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬載脂蛋白B(Apo-B)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬孕(PROG)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬孕激素(P)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒
Human myosin (Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白(Myosin)試劑盒
Rabbitprothrombinfragme1+2,F1+2ELISAKit 兔原片段F1+2(F1+2)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAi-TM甲狀腺微粒體抗體(TM抗體)
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性熒光定量試劑盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒
5-三磷酸肌醇受體1抗體
周期素D2抗體
IL1R2重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)
ANP32A重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
BLOC1S2 Protein Human 重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
PGLYRP1 Protein Mouse 重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)
BLOC1S2 Protein Human 重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL1R2重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PGLYRP1 Protein Mouse 重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ANP32A重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠骺軟骨細(xì)胞大鼠谷酰胺合成酶(GLUL)試劑盒 ,英文名: GLUL ELISA Kit
Rabbit ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒
大腸桿菌(O157:H7)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIP-1Beta/CCL4(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Beta)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白1β
體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKit5-HT犬5羥色胺
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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