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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱:小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源:冠狀動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮分離自冠狀動(dòng)脈組織;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類(lèi)原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過(guò)心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,是一薄層的專(zhuān)門(mén)上皮細(xì)胞,它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最小的微血管。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
轉(zhuǎn)基因植物Bt基因核酸試劑盒 48T
轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
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豬氧化酶(XOD)試劑盒
Human keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)試劑盒/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒
Porcinephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 豬0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlphaNAG(HumanAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit人αN已酰氨基葡糖苷酶
血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次
PlaHumanVitaminC,VCELISAKit植物C(VC)試劑盒
17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框82抗體
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體
FZD1重組小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mgCD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原
F3重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein
BNIP3L Protein Human 重組人 BNIP3L 蛋白
APCS Protein Mouse 重組小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mgCD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原
BNIP3L Protein Human 重組人 BNIP3L 蛋白
FZD1重組小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
APCS Protein Mouse 重組小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
F3重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒 ,英文名: BMPR-1A ELISA Kit
Rabbit ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 兔子白介素10(IL-10)試劑盒
日本血吸蟲(chóng)(SJ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMKK6(Humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6)ELISAKit人原活化蛋白激酶激酶6
體液脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitFSH犬促卵泡素
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作