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更新時間:2024-11-04
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7439 |
細胞簡介:
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細胞是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細胞,缺乏成熟內(nèi)皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復。研究顯示,內(nèi)皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISAKit ELISA.
豬乙酰(ACh)ELISAKit ELISA.
豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISAKit ELISA.
豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISAKit ELISA.
豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒
Human thyroglobulin (TG) ELISA Kit 人甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒
GuineaPig50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 豚鼠血清總補體(CH50)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAMS/AMY(HumanAlpha-Amylase)ELISAKit人α
血液過氧化物酶(GSHPX)活性酶動力比色法定量試劑盒20次
Porcineai-thrombieceptor,AELISAKit豬抗受體(A)試劑盒
胞漿5'核苷酸酶1B抗體
運動神經(jīng)元及胰腺同源蛋白1抗體
Shiga toxin II subunit B重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白 (His 標簽) Protein
TP I (topoisomerase I 0.5mgTP I (topoisomerase I ) 拓普西異構酶Ⅰ抗原
SERPING1重組人 SerpinG1 / C1 inhibitor / C1IN 蛋白 (His 標簽) Protein
ARL6IP6 Protein Human 重組人 ARL6IP6 蛋白
LAMP3 Protein Human 重組人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 蛋白 (His 標簽)
TP I (topoisomerase I 0.5mgTP I (topoisomerase I ) 拓普西異構酶Ⅰ抗原
ARL6IP6 Protein Human 重組人 ARL6IP6 蛋白
Shiga toxin II subunit B重組腸出血性大腸桿菌 (EHEC) stx2B / Shiga toxin II subunit B 蛋白 (His 標簽) Protein
LAMP3 Protein Human 重組人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 蛋白 (His 標簽)
SERPING1重組人 SerpinG1 / C1 inhibitor / C1IN 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞大鼠骨橋素(OPN)試劑盒 ,英文名: OPN ELISA Kit
Rabbit S100 protein (S-100) ELISA Kit 兔子S100蛋白(S-100)試劑盒
類鼻疽伯克霍爾德菌(PP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-1ELISAkit大鼠基質金屬蛋白酶1
體液基質金屬蛋白酶(MMP-9)琥珀酰明膠法比色定量試劑盒20次
ELISAKitMYO/MB犬肌紅蛋白
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