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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱:小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞
組織來(lái)源:股骨、脛骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干分離自股骨、脛骨;骨內(nèi)膜是一層致密結(jié)締組織膜,覆蓋在骨的表面(關(guān)節(jié)面除外),新鮮骨內(nèi)膜呈粉紅色,含有豐富的血管、神經(jīng)和成骨細(xì)胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內(nèi)膜編織在一起。因而骨內(nèi)膜與骨質(zhì)結(jié)合甚為牢固。骨內(nèi)膜富含血管、神經(jīng),通過(guò)骨質(zhì)的滋養(yǎng)孔分布于骨質(zhì)和骨髓。骨內(nèi)膜分內(nèi)、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質(zhì),使骨內(nèi)膜固定于骨面;內(nèi)層疏松,含成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞(分別具有產(chǎn)生新骨質(zhì)和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質(zhì)的網(wǎng)眼也襯著一層菲薄的結(jié)締組織膜,叫做骨膜。骨內(nèi)膜的內(nèi)層和骨膜有分化成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的能力,以形成新骨質(zhì)和破壞、改造已生成的骨質(zhì),所以對(duì)骨的發(fā)生、生長(zhǎng)、修復(fù)等具有重要意義。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過(guò)程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干采用沖洗骨髓、消化骨內(nèi)膜、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬雌激素(E)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬雌二醇受體(ER)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
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One pit protein Caveolin1 (Cav-1) ELISA Kit 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)試劑盒
Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit 豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha-GST(HumanAlpha-glathioneS-ansferases)ELISAKit人αS轉(zhuǎn)移酶
血液結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次
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乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體
PRLR重組小鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)
ATP5D重組人 ATP5D 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白
5-LOX (5-lipoxygenase 0.5mg5-LOX (5-lipoxygenase) 5-脂氧合酶抗原
ANP32A Protein Human 重組人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PGLYRP1重組小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
IL1R2 Protein Rat 重組大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BLOC1S2重組人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1A(SREBP-1A)試劑盒 ,英文名: SREBP-1A ELISA Kit
Rabbit type III procollagen (P III NP) ELISA Kit 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒
破傷風(fēng)芽孢梭菌(CT)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMMP-13(HumanMaixmetalloproteinase13)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶13
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-3)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitET-1犬內(nèi)皮素1
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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