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更新時間:2024-11-04
小鼠腓腸肌細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨骼肌組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7738 |
細胞簡介:
小鼠腓腸肌分離自小腿肌肉組織;腓腸肌位于小腿后面的皮下,是一個淺表的肌肉,當人體站立時,可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側群淺組肌肉,有內、外二頭,內側頭起自股骨內側髁上的三角形隆起,外側頭起自股骨外側髁的近側端,在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大,在腘窩下角彼此鄰近,所成夾角多為25°~30°,此肌下行與比目魚肌移行為跟腱,止于跟骨結節(jié)。腓腸肌的動脈發(fā)自腘動脈、靜脈與動脈伴行,注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經全部來自脛神經。包括內、外側肌神經。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上,直立時,腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關節(jié),并調節(jié)小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕,可以切取腓腸肌內側頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉。腓腸肌還可影響足的縱弓,該肌癱瘓或時,足縱弓將加深。該肌由脛神經支配,股骨髁上骨折時,因腓腸肌收縮遠側端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細胞屬于骨骼肌細胞的一種,骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腓腸肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腓腸肌經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
豬白細胞間介素10 英文名稱: Porcine Ierleukin 10 規(guī)格: 英文縮寫: IL-10
豬白細胞間介素1β 英文名稱: Porcine Ierleukin 1β 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1β
豬白細胞間介素 1 英文名稱: Porcine Ierleukin 1 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1
豬白細胞間介素2 英文名稱: Porcine Ierleukin 2 規(guī)格: 英文縮寫: IL-2
豬干擾素γ(IFN-γ)ELISA 試劑盒
Human a disiegrin and metalloproteinase 10 (ADAM10) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)試劑盒
PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 豬內皮型合成酶(eNOS)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha2-PI(MouseAlpha2-plasmininhititor)ELISAKit小鼠α2纖溶酶抑制物
血液賴(lysine)含量熒光定量試劑盒20次
Nudemousecyclooxygenase-2,COX-2ELISAKit裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒
ORC3蛋白抗體
線粒體核糖體蛋白S16抗體
LON PROTEASE重組大腸桿菌 Lon protease 蛋白 (His 標簽) Protein
TNF-alpha 壞死因子-α抗原 0.5mgTNF-alpha 壞死因子-α抗原
TNK2重組人 ACK1 / TNK2 蛋白 (GST 標簽) Protein
AMY2B Protein Human 重組人 AMY2B 蛋白
NGF Protein Human 重組人 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
TNF-alpha 壞死因子-α抗原 0.5mgTNF-alpha 壞死因子-α抗原
AMY2B Protein Human 重組人 AMY2B 蛋白
LON PROTEASE重組大腸桿菌 Lon protease 蛋白 (His 標簽) Protein
NGF Protein Human 重組人 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
TNK2重組人 ACK1 / TNK2 蛋白 (GST 標簽) Protein
小鼠腓腸肌細胞大鼠核呼吸因子1(F1)試劑盒 ,英文名: F1 ELISA Kit
Rat 5 hydroxyyptamine (5-HT) ELISA Kit 大鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒
RatleukoieneE4,LT-E4ELISAKit 大鼠白三烯E4(LTE4)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforeNOS-3(HumanAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit人內皮型合成酶3
細胞0脂酶D2(PhospholipaseD2)水解活性比色法定量試劑盒20次
RatLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒
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