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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-31
兔肌源性干細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
骨骼肌組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7080 |
細(xì)胞簡介:
兔肌源性干分離自肌肉組織;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點;近年來,肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞;平時處于靜止?fàn)顟B(tài),在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時才會激活;并且隨著年齡的增加,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn),EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細(xì)胞增生。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化,從而保持干細(xì)胞表型。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔肌源性干采用膠原酶--聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,最后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒 小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠轉(zhuǎn)酶試劑盒、小鼠轉(zhuǎn)酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、小鼠基轉(zhuǎn)移酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠表皮生長因子試劑盒 小鼠表皮生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠表皮生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠表皮生長因子試劑盒、小鼠表皮生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠棒狀桿菌試劑盒 小鼠棒狀桿菌試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠棒狀桿菌試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠棒狀桿菌試劑盒、小鼠棒狀桿菌eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠己糖激酶(HK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human sorbitol dehydrogenase (SDH) ELISA Kit 人脫氫酶(SDH)試劑盒
HumanDNABindingProtein,DBPELISAKit 人DNA結(jié)合蛋白(DBP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAi-glucoprotein210,GP210試劑盒人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物賴羥化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
HumanVitaminA,VAELISAKit人A(VA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
P物質(zhì)抗體
連接粘附分子2抗體
NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)重組蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
LALBA重組人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)重組蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
LALBA重組人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
兔肌源性干細(xì)胞大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)試劑盒 ,英文名: GMCSF/CSF2 ELISA Kit
Mouse keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)試劑盒/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒
Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanpaxillin,PaxELISAKit人樁蛋白
同位素[γ32P]ATP激酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitPIAb-IgG/IgM大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM
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