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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔海綿體平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
兔海綿體平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：附睪特異蛋白9抗體 味覺受體蛋白1抗體 SCE1蛋白抗體 兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 人破骨細(xì)胞 NUGC-3人胃癌細(xì)胞 SK-MES-1 (人肺鱗癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：103
更新時間：2024-10-31
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔海綿體平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
海綿體 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7954 |
細(xì)胞簡介：
兔海綿體平滑肌分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是最硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
方法簡介：
實驗室分離的兔海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔海綿體平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔海綿體平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠P物質(zhì)試劑盒 小鼠P物質(zhì)試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠P物質(zhì)試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠P物質(zhì)試劑盒、小鼠P物質(zhì)eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠p53試劑盒 小鼠p53試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠p53試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠p53試劑盒、小鼠p53eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠N端前腦素試劑盒 小鼠N端前腦素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠N端前腦素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠N端前腦素試劑盒、小鼠N端前腦素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠L選擇素試劑盒 小鼠L選擇素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠L選擇素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠L選擇素試劑盒、小鼠L選擇素eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat Mueller tube inhibitory substance / ai Mueller tube hormone (MIS/AMH) ELISA Kit 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒
HumanC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 人C型尿肽(CNP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-rabiesvirusaibody,ai-RV試劑盒人抗狂犬病毒抗體(ai-RV)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物氧化酶活性測定試劑盒20次
Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
PE-Cy5標(biāo)記人CD55單克隆抗體
顆粒酶B抗體
CLEC1A重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GIP (Gastric Inhibitory polypeptide 0.5mgGIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽(抗原)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein
FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)
GIP (Gastric Inhibitory polypeptide 0.5mgGIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽(抗原)
FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CLEC1A重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein
兔海綿體平滑肌細(xì)胞大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn)試劑盒 ，英文名： Lptn ELISA Kit
Mouse hepatitis B core aibody (HBcAb) ELISA Kit 小鼠乙型肝核心抗體(HBcAb)試劑盒
RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGATA4ELISAKitmuman人GATA結(jié)合蛋白4試劑盒
細(xì)胞合成酶活性比色法定量試劑盒20次
RatP-SelectinELISAKit大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
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