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更新時間:2024-10-31
兔關節(jié)軟骨細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
關節(jié)軟骨組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7003 |
細胞簡介:
兔關節(jié)軟骨分離自關節(jié)軟骨組織;關節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節(jié)面,這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中,關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動,使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內,這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔關節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔關節(jié)軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
小鼠癌標志物試劑盒 小鼠癌標志物試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠癌標志物試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠癌標志物試劑盒、小鼠癌標志物試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠淋巴細胞趨化因子試劑盒 小鼠淋巴細胞趨化因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠淋巴細胞趨化因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠淋巴細胞趨化因子試劑盒、小鼠淋巴細胞趨化因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠淋巴細胞功能相關抗原試劑盒 小鼠淋巴細胞功能相關抗原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠淋巴細胞功能相關抗原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠淋巴細胞功能相關抗原試劑盒、小鼠淋巴細胞功能相關抗原試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子試劑盒 小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子試劑盒、小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human signal recognization paicle aibody (SRP) ELISA Kit 人抗信號識別顆??贵w(SRP)試劑盒
Humansecretorycompone,SCELISAKit 人分泌成分(SC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACAELISAKit大鼠抗中性粒/中心體抗體
一抗涂板(COATING)緩沖液100毫升
Mousenuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒規(guī)格
NT5C3樣蛋白抗體
相關抗原7抗體
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
通用轉錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)重組蛋白 Recombinant General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1 (GTF2H1)
NAPA重組人 NAPA / alpha-SNAP 蛋白 Protein
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
通用轉錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)重組蛋白 Recombinant General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1 (GTF2H1)
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
NAPA重組人 NAPA / alpha-SNAP 蛋白 Protein
兔關節(jié)軟骨細胞大鼠絡絲蛋白(RL)試劑盒 ,英文名: RL ELISA Kit
Mouse insulin like growth factor binding protein 2 (IGFBP-2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒
RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 大鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGDNF(Humanglialcellline-derivedneuroophicfactor)ELISAKIT人膠質細胞系來源的神經營養(yǎng)因子
細胞肝脂酶活性比色法定量試劑盒20次
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。