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更新時(shí)間:2024-10-30
人牙周膜干細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
牙周膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7677 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人牙周膜干分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi),另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內(nèi);牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來(lái)源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來(lái)修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。牙周膜干細(xì)胞參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過(guò)程?,F(xiàn)在,利用牙周膜干細(xì)胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人牙周膜干采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素4(mouse -4) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠(mouse NO) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠骨保護(hù)素(mouse OPG) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠骨橋素(mouse OPN) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒
HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神經(jīng)生長(zhǎng)導(dǎo)向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
DuckIerleukin2,IL-2試劑盒鴨白介素2(IL-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
棗椰樹(shù)(datepalm)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脫氫表雄同(DHEA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF750標(biāo)記的髓鞘堿性蛋白/磷脂堿性蛋白抗體
二酰基甘油?;D(zhuǎn)移酶2樣蛋白4抗體
CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein
顆粒酶H(GZMH)重組蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)
VTI1A重組人 VTI1A 蛋白 Protein
CLEC4D Protein Human 重組人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
顆粒酶H(GZMH)重組蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)
CLEC4D Protein Human 重組人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白
CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
VTI1A重組人 VTI1A 蛋白 Protein
人牙周膜干細(xì)胞大鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)試劑盒 ,英文名: HSF1 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)試劑盒
RatAquaporin3,AQP-3ELISAKit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGuineapigierleukin4,IL-4ELISAKit豚鼠白介素4
細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次
Rattyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激酶2(Tie-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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