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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:111
更新時間:2024-10-30
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人心肌成纖維細胞
組織來源:心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人心肌成纖維分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來,人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護作用,而且還具有自分泌和旁分泌功能,影響心肌細胞的結(jié)構(gòu)和生理功能;心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對心肌成纖維細胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。
方法簡介:
公司實驗室分離的人心肌成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人心肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠活化蛋白C(APC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠(ypsin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠尿微量白蛋白(ALB)試劑盒 96T/48T
Rat parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)試劑盒
Humandynorphin,DynELISAKit 人強啡肽(Dyn)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3試劑盒人25羥基3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性比色法定量試劑盒20次
MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit小鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒規(guī)格:96T/48T
5-羥色胺受體7抗體
蛋白酶激活受體4抗體
SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白 Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
EDEM2重組人 EDEM2 / C20orf31 蛋白 Protein
CSNK2A1 Protein Human 重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白
環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)重組蛋白 Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
CSNK2A1 Protein Human 重組人 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
SELE重組小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IL11RA Protein Canine 重組狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋白
EDEM2重組人 EDEM2 / C20orf31 蛋白 Protein
人心肌成纖維細胞大鼠三葉因子1(TFF1)試劑盒 ,英文名: TFF1 ELISA Kit
Mouse sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒
RatEndotheliallipase,ELELISAKit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHA(MouseHyaluronicacid)ELISAKit小鼠透明質(zhì)酸
細胞半胱蛋白酶-8(CASPASE-8)活性熒光定量試劑盒20次
RatVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作