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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

產(chǎn)品簡介:

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:KIAA1429蛋白抗體 CD351抗體 環(huán)指蛋白32抗體 人小腸平滑肌細(xì)胞 人牙髓干細(xì)胞 SNB-19人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞 NCI-H1703 (人肺鱗癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:110

更新時間:2024-10-30

產(chǎn)品特性Product characteristics

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!

產(chǎn)品名稱:人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

組織來源:外周血

產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

培養(yǎng)信息:

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形,樹突狀

傳代特性:屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞簡介:

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

人外周血DC分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的信號,可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。

方法簡介:

實驗室分離的人外周血成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)


培養(yǎng)步驟:

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

細(xì)胞松弛素B   `1mg

CytochalasinB,Helmihosporiumdematioideum

   50mg

CytochromeC,frombovinehea

小鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒

Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒

HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人血栓素A2(TX-A2)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAquaporin3,AQP-3試劑盒人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

植物乙酰羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量試劑盒20

Humahyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒

棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶GODZ抗體

博萊水解酶抗體

KIRREL3重組小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.1mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)(抗原)

APOL1重組人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FCGR3B Protein Human 重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)重組蛋白 Recombinant Prolactin Induced Protein (PIP)

FCGR3B Protein Human 重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白

PTN重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白  Protein

KLRK1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標(biāo)簽)

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 標(biāo)簽) Protein

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)大鼠神經(jīng)介素S(NMS)試劑盒 ,英文名: NMS ELISA Kit

Mouse fibronectin (FN) ELISA Kit 小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒

RatneuropeptideY,NP-YELISAKit 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBcAb(IgM)乙型肝核心抗體IgM

細(xì)胞半胱蛋白酶-2(CASPASE-2)活性比色法定量試劑盒20

RatVitaminK1,VK1ELISAKit大鼠K1(VK1)試劑盒

收到細(xì)胞如何處理?

人外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。

2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作


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