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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-10-30
人外周血淋巴細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
血液組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7627 |
細(xì)胞簡介:
人外周血淋巴分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)是白細(xì)胞的一種,是體積最小的白細(xì)胞。其由淋巴器官產(chǎn)生,主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,是機體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識別功能的細(xì)胞系,按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T淋巴細(xì)胞(又名T細(xì)胞)、B淋巴細(xì)胞(又名B細(xì)胞)和自然殺傷(NK)細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,它們的最初來源是相同的,都來自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后,T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,再分化為致敏T淋巴細(xì)胞,參與細(xì)胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等;而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞,再分化為漿細(xì)胞,產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產(chǎn)生抗體,提呈抗原,以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié);NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng),具有殺傷靶細(xì)胞的作用。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人外周血淋巴經(jīng)過檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠表皮生長因子(EGF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒
Rat osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)試劑盒
Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗體(Apl/APA)試劑盒 進口分裝
Humanbetacellulin,BTC試劑盒人β細(xì)胞素(BTC)試劑盒
植物種子甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒3次
Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()試劑盒
轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2抗體
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
人外周血淋巴細(xì)胞大鼠神經(jīng)型合酶(NOS1)試劑盒 ,英文名: NOS1 ELISA Kit
Mouse cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒
RatVitaminC,VCELISAKit 大鼠C(VC)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHB-EGF(Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor)ELISAKit人肝素結(jié)合性表皮生長因子
細(xì)胞半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)試劑盒