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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人腎小管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人腎小管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：鈣激活鉀通道蛋白β4抗體 FBXL22蛋白抗體 Rho GTP酶激活蛋白5抗體 人食管成纖維細(xì)胞 人子宮肌瘤組織源細(xì)胞 SNU-333人腎細(xì)胞癌細(xì)胞 SK-MEL-1 (人皮膚黑色素瘤細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：108
更新時(shí)間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人腎小管上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腎組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7580 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人腎小管上皮分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲；遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞，腎小管上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項(xiàng)重要技術(shù)，目前該分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等。腎小管上皮細(xì)胞主要功能：①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿；③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng)；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對(duì)腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深，腎小管上皮細(xì)胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型，在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小管上皮細(xì)胞 采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人腎小管上皮細(xì)胞 經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 96T/48T
神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒 96T/48T
熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)試劑盒 96T/48T
腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T
豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)試劑盒 ，英文名： GH ELISA Kit
Human nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)試劑盒
MonkeyLaminin,LNELISAKit層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBLAPELISAKit(Rabbit)兔骨堿性0酸酶試劑盒
細(xì)菌耐酸(ACID-FAST)染色試劑盒50次
rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit兔子巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒規(guī)格：96T/48T
抑癌基因p16抗體
RASGEF1B蛋白抗體
HAVCR2重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)重組蛋白 Recombinant Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)
NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 Protein
IL13RA1 Protein Human 重組人 IL13RA1 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)重組蛋白 Recombinant Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)
IL13RA1 Protein Human 重組人 IL13RA1 蛋白
HAVCR2重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 Protein
人腎小管上皮細(xì)胞大鼠速激肽受體2(TACR2)試劑盒 ，英文名： TACR2 ELISA Kit
Mice of homocysteine (Hcy) ELISA Kit 小鼠同型半胱(Hcy)試劑盒
ratCoicosterone,COELISAKit 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHIS(MouseHistamine)ELISAKit小鼠組胺
細(xì)胞ROCK激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPⅢ大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
