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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:101
更新時(shí)間:2024-10-30
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產(chǎn)品名稱:人乳腺上皮細(xì)胞
組織來(lái)源:乳腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人乳腺上皮分離自乳腺組織;乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,主要由腺上皮細(xì)胞組成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡;近年來(lái)的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系,體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開(kāi)展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織,乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長(zhǎng)因子共同調(diào)控,其中乳腺表達(dá)的生長(zhǎng)因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮分離自分娩后3-5天的乳腺組織,為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞,呈多角形、圓形以及短梭形;乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子免疫球蛋白M(IgM)試劑盒 96T/48T
兔子免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T
兔子免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T
兔子免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒
Humaniegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISAKit 人整合素連接激酶1(ILK-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCalreticulin,C試劑盒人鈣網(wǎng)蛋白(C)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體
p21激活激酶1抗體
GFP重組水母 GFP 蛋白 Protein
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 0.5mgTRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原
AMICA1重組人 JAML / AMICA 蛋白 Protein
GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白
IL32 Protein Human 重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽)
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase 0.5mgPLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纖溶酶原激活因子(多肽)
GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
FGF1 Protein Human 重組人 aFGF / FGF1 蛋白
CDK1重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
人乳腺上皮細(xì)胞大鼠糖原0酸化酶B(PYGB)試劑盒 ,英文名: PYGB ELISA Kit
Mouse carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 小鼠酶(CA)試劑盒
RatAndrostenedione,ASDELISAKit 大鼠雄(ASD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHNP1-3(Humanneuophilpeptide1-3)ELISAKit人中性粒細(xì)胞防御素1-3
細(xì)胞PKCζ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitFlt3L大鼠FMS樣酪激酶3配體
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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