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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-10-30
人晶狀體上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
晶狀體組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7404 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人晶狀體上皮分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞分開;因而,晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無(wú)神經(jīng)和血管組織的干擾,又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染,保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過(guò)程中,晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長(zhǎng)而變成晶狀體纖維細(xì)胞,并最終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明,晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長(zhǎng)因子的調(diào)控,包括表皮生長(zhǎng)因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,呈單層生長(zhǎng)、連成膜狀。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),體外培養(yǎng)是研究其生長(zhǎng)規(guī)律的主要手段。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人晶狀體上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人晶狀體上皮經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠IgE 英文名稱: immunoglobulin E 規(guī)格: 英文縮寫: IgE
小鼠IgG 英文名稱: immunoglobulin G 規(guī)格: 英文縮寫: IgG
小鼠IgM 英文名稱: immunoglobulin M 規(guī)格: 英文縮寫: IgM
小鼠白介素-1α 英文名稱: ierleukin-1α 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1α
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 試劑盒
Human growth hormone releasing peptide ghrELISA Kit 人生長(zhǎng)激素釋放肽ghr試劑盒
HumahymosinELISAKit 人肽(Thymosin)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-P試劑盒人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒
植物細(xì)胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humaumorangiogenesisfactors,TAFELISAKit人血管生長(zhǎng)因子(TAF)試劑盒
雙甲基精水解酶1抗體
AF750標(biāo)記的磷酸化細(xì)胞核因子抗體
NAALADL1重組小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)
ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35 1mgAmyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉樣肽25-35(多肽)
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NEGR1重組小鼠 NEGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白
AMPK重組人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein
人晶狀體上皮細(xì)胞大鼠硝基酪酸()試劑盒 ,英文名: ELISA Kit
Mouse heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
MouseCoicosterone,COELISAKit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanankyrinB,Ank-BELISAKit人錨蛋白B
細(xì)胞GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitE3大鼠雌三醇
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