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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

人宮頸癌成纖維細胞

產(chǎn)品簡介:

人宮頸癌成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:PAP1結(jié)合蛋白抗體 FAM23A蛋白抗體 細胞膜鈣ATP酶4抗體 人骨髓來源內(nèi)皮祖細胞 兔心肌成纖維細胞 SW 156 [SW-156, SW156]人腎細胞癌細胞 MA-782 (小鼠乳腺癌細胞)

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:88

更新時間:2024-10-30

產(chǎn)品特性Product characteristics

人宮頸癌成纖維細胞

人宮頸癌成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

宮頸癌組織

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X7616

細胞簡介:

人宮頸癌組織源成纖維分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發(fā)生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發(fā)病率位于女性腫瘤的位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延,向下至陰道穹窿及陰道壁,向上可侵犯子宮體,向兩側(cè)可侵犯盆腔組織,向前可侵犯膀胱,向后可侵犯直腸。也可通過淋巴管轉(zhuǎn)移至宮頸旁、髂內(nèi)、髂外、腹股溝淋巴結(jié),晚期甚至可轉(zhuǎn)移到鎖骨上及全身其他淋巴結(jié)。血行轉(zhuǎn)移比較少見,常見的轉(zhuǎn)移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細胞生存的外部環(huán)境,由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)構(gòu)成,包括纖維細胞,免疫細胞,內(nèi)皮細胞,間充質(zhì)干細胞等,腫瘤細胞通過調(diào)控這些間質(zhì)細胞,創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,從而使得腫瘤得到進展。越來越多的證據(jù)表明,腫瘤微環(huán)境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環(huán)境中,研究最多也是最主要的間質(zhì)細胞是腫瘤相關(guān)成纖維細胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。宮頸癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介:

公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

人宮頸癌成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

人宮頸癌成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

豚鼠P物質(zhì)   英文名稱:   Guinea pig Substance P   規(guī)格:      英文縮寫:   SP

豚鼠睪激素   英文名稱:   Guinea pig Testosterone   規(guī)格:      英文縮寫:   TESTO

豚鼠免疫球蛋白E   英文名稱:   Immunoglobulin E   規(guī)格:      英文縮寫:   IgE

豚鼠粘多糖   英文名稱:   Mucopolysaccharide   規(guī)格:      英文縮寫:   MLC

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 大鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒

Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBigEndothelin,BigET試劑盒人大內(nèi)皮素(BigET)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物總氨基酸含量比色法定量試劑盒20

HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit人超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒規(guī)格:96T/48T

橋粒斑菲素蛋白3抗體

轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體

M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

人宮頸癌成纖維細胞大鼠血紅素氧合酶1(HO1)試劑盒 ,英文名: HO1 ELISA Kit

Mouse coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒

Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AILR3ELISAKit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancecropinB,CecBELISAKit人殺菌肽B

細胞C-MET激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

ELISAKitDAT大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。


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