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更新時間:2024-10-29
大鼠真皮毛乳頭細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
毛囊 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7960 |
細胞簡介:
大鼠真皮毛乳頭分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。真皮毛乳頭細胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細胞。在毛囊發(fā)育早期,真皮細胞向單層上皮細胞發(fā)出真皮信號,刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細胞向下方的真皮發(fā)出表皮信號,誘導(dǎo)其形成有成纖維細胞組成的凝集細胞團。在此過程中,毛母質(zhì)細胞逐漸包裹凝集細胞團,形成成熟的真皮毛乳頭細胞。作為毛囊中的重要細胞群,真皮毛乳頭細胞的分子機制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認識和解析。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠真皮毛乳頭采用膠原酶-混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠真皮毛乳頭經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠真皮毛乳頭細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 2 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-R2
血管內(nèi)皮生長因子受體3 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 3 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-R3
血管活性腸肽 英文名稱: vasoactine inestinal peptide 規(guī)格: 英文縮寫: VIP
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 英文名稱: Visfatin 規(guī)格: 英文縮寫: Visfatin
小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai histone aibody (AHA) ELISA Kit 人抗組蛋白抗體(AHA)試劑盒
HumanNeurotensin,ELISAKit 人神經(jīng)降壓素()試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor8-iso-PGELISAKit大鼠8異前列腺素
異硫酸胍1公斤
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規(guī)格:96T/48T
間隙連接蛋白40抗體
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EGF重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein
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CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
FSTL1 Protein Mouse 重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
EGF重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein
FSTL1 Protein Mouse 重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNG重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein
大鼠真皮毛乳頭細胞大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒 ,英文名: CETP ELISA Kit
Porcine oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒
ELISA 小鼠激活素A(mouse Activin A) 進口分裝
CLIAKitforLPA(HumanL-phenylalanine)ELISAKit人苯
通用型1毫升1厘米光徑塑料比色皿1個
ELISAKitALV-AG雞白血病病毒抗原
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