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產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-10-29
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產(chǎn)品名稱:大鼠心臟纖維原細(xì)胞
組織來源:心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠心臟纖維原分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞。胞體呈梭形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá)。當(dāng)組織受損時(shí),纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過程。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞,如在組織損傷后的修復(fù)過程中,纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞。纖維細(xì)胞較小,呈多角形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá)。成纖維細(xì)胞較大,呈星形或梭形,有突起,細(xì)胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質(zhì)較多。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對(duì)心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長(zhǎng)因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,其功能活動(dòng)也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對(duì)心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟纖維原采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔色素上皮衍生因子試劑盒 兔色素上皮衍生因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔色素上皮衍生因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔熱休克蛋白90試劑盒 兔熱休克蛋白90試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔熱休克蛋白90試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白90試劑盒、兔熱休克蛋白90 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔熱休克蛋白70試劑盒 兔熱休克蛋白70試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔熱休克蛋白70試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白70試劑盒、兔熱休克蛋白70試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔熱休克蛋白40試劑盒 兔熱休克蛋白40試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔熱休克蛋白40試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白40試劑盒、兔熱休克蛋白40 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 大鼠酶2(CA-2)試劑盒
HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 人新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanclusterin,CLU試劑盒人凝聚素(CLU)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白脫乙?;?span>3(HDAC3)活性比色法定量試劑盒20次
Humaeversei-iodothyronine,3ELISAKit人反三甲狀腺原(3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
谷受體2A重組兔單克隆抗體
水通道蛋白-9抗體
JAM3重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 Protein
Beta-Amyloid(1-40 0.1mgBeta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)
DCX重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標(biāo)簽) Protein
HDAC3 Protein Human 重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
ICOS Protein Rat 重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Beta-Amyloid(1-40 0.1mgBeta-Amyloid(1-40) β淀粉樣肽(1-40)(多肽蛋白)
HDAC3 Protein Human 重組人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
JAM3重組小鼠 JAM3 / JAM-C 蛋白 Protein
ICOS Protein Rat 重組大鼠 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DCX重組人 DCX 蛋白 (aa 45-150, GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠心臟纖維原細(xì)胞大鼠轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)試劑盒 ,英文名: TKT ELISA Kit
Mouse ai endothelial cell aibody (AECA) ELISA Kit 小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)試劑盒
Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISAKit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanleukoieneE4,LT-E4ELISAKit人白三烯E4
唾液酸(SA)比色法定量試劑盒50/100次
ELISAKitACP-5b大鼠抗酸性0酸酶5b
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