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更新時間:2024-10-29
大鼠微血管周細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
微血管組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7567 |
細胞簡介:
大鼠微血管周分離自微血管組織;周細胞(pericyte)又稱Rouget細胞和壁細胞,是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞,可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內皮細胞的成熟過程。此外,周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點之一,所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產(chǎn)生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜,基膜上有多種細胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控;毛細血管受損時,周細胞還可增殖,分化為內皮細胞和成纖維細胞。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠血管周采用膠原酶-聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠微血管周經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人載脂蛋白E試劑盒 人載脂蛋白E試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白E試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人載脂蛋白E試劑盒、人載脂蛋白E 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人載脂蛋白C3試劑盒 人載脂蛋白C3試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白C3試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人載脂蛋白C3試劑盒、人載脂蛋白C3 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人載脂蛋白B100試劑盒 人載脂蛋白B100試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白B100試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人載脂蛋白B100試劑盒、人載脂蛋白B100 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
人載脂蛋白A5試劑盒 人載脂蛋白A5試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人載脂蛋白A5試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人載脂蛋白A5試劑盒、人載脂蛋白A5 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
豚鼠白介素18(IL-18)試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit
Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒
rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-CGELISAKit大鼠絨毛膜β
細菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規(guī)格:96T/48T
泛肌動蛋白重組兔單抗
溶質載體家族22成員10抗體
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽) Protein
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標簽)
Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標簽)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽) Protein
大鼠微血管周細胞人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA 試劑盒
Human ansfer factor (TF) ELISA Kit 人轉移因子(TF)試劑盒
Humahymidylatesyhetase,TSELISAKit 人胸苷酸合成酶(TS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanIerleukin17,IL-17試劑盒人白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humaniestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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