服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:111
更新時(shí)間:2024-10-29
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 | YS-01X7392 |
細(xì)胞簡介:
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列,部分細(xì)胞聚集成團(tuán),細(xì)胞呈圓形或橢圓形,核圓且相對透明,有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起;該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞,在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷,研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制有利于青光眼發(fā)病機(jī)制的研究。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)采用-膠原酶聯(lián)合消化法,結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒
HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancyclophilinA,CyPA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白磷酸酶2C亞型α抗體
嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PR (Progestogerone receptor 0.5mgPR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)
ABL1重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
INS Protein Human 重組人 Insulin / INS 蛋白
DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PR (Progestogerone receptor 0.5mgPR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)
INS Protein Human 重組人 Insulin / INS 蛋白
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ABL1重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒
Human tumor associated aigen (TAA) ELISA Kit 人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)試劑盒
HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1試劑盒人胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)明膠法比色定量試劑盒20次
HumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端IgM(Lebtospira)試劑盒規(guī)格:96T/48T