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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時(shí)間:2024-10-29
大鼠神經(jīng)干細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腦組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 球形 | YS-01X7437 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠神經(jīng)干分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞,它可以通過不對(duì)等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強(qiáng)調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同,分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種,它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間甚至終生,對(duì)損傷和疾病具有反應(yīng)能力。神經(jīng)干細(xì)胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點(diǎn),體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長(zhǎng),予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細(xì)胞懸液,將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中,2×105個(gè)細(xì)胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次,培養(yǎng)條件不變。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)干采用消化后差速貼壁,結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人著絲粒蛋白B試劑盒 人著絲粒蛋白B試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人著絲粒蛋白B試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人著絲粒蛋白B試劑盒、人著絲粒蛋白B 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人Apelin36試劑盒 人Apelin 36試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人Apelin 36試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人Apelin 36試劑盒、人Apelin 36 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
雞白介素4試劑盒 雞白介素4試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 雞白介素4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:雞白介素4試劑盒、雞白介素4 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠泰澤病原體試劑盒 小鼠泰澤病原體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠泰澤病原體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠泰澤病原體試劑盒、小鼠泰澤病原體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豚鼠白介素5(IL-5)試劑盒 ,英文名: IL-5 ELISA Kit
Human dynamin 2 (DNM2) ELISA Kit 人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)試劑盒
RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit 兔子白介素10(IL-10)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-EP(humanBeta-Endorphin)ELISAKit人β內(nèi)啡肽
細(xì)菌亞鹽還原酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ZC3H15蛋白抗體
磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體
LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein
DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原
STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白
DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 Protein
BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白
STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠神經(jīng)干細(xì)胞兔骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒
Human ypsinogen II (y- II) ELISA Kit 人原Ⅱ(y-Ⅱ)試劑盒
Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgGELISAKit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanglathioneS-ansferases,GSTpi試劑盒人硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性比色法定量試劑盒20次
HumanMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。