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更新時間:2024-10-29
大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
關(guān)節(jié)軟骨組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7745 |
細(xì)胞簡介:
大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨分離自顳下頜關(guān)節(jié)軟骨組織,顳下頜關(guān)節(jié)又稱顳頜關(guān)節(jié)"或下頜關(guān)節(jié)"。由下頜頭與顳骨下頜窩和關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)組成,左右合成一聯(lián)合關(guān)節(jié),主理張口閉口和咀嚼運(yùn)動。關(guān)節(jié)囊松弛,側(cè)方為內(nèi)、外側(cè)韌帶所加強(qiáng)。囊內(nèi)的關(guān)節(jié)盤呈卵圓形,由纖維軟骨組成,區(qū)分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀,前凹后凸,與關(guān)節(jié)結(jié)節(jié)和下頜窩的凸凹輪廓相對應(yīng);下面凹正對下頜頭,周緣與關(guān)節(jié)囊相接,前緣與穿過關(guān)節(jié)囊的翼外肌腱相連。關(guān)節(jié)盤將關(guān)節(jié)腔分成上、下兩半。關(guān)節(jié)外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍(lán)色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,同時當(dāng)受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細(xì)胞,軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成,這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運(yùn)動,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關(guān)節(jié)運(yùn)動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,細(xì)胞核圓形或卵圓形、染色淺,細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱 方法 規(guī)格
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit ELISA.
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA.
人D(VD)ELISAKit ELISA.
豬白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒
Human ai IgA aibody (ai-IgA-Ab) ELISA Kit 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)試劑盒
Porcineplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALCAM(HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule)ELISAKit人白細(xì)胞活化黏附因子
血液逆轉(zhuǎn)錄酶(REVERSEANSCREPTASE)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3/Flt-4ELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒
NT5C3蛋白抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體
NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽) Protein
PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT),Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT),Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)
AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標(biāo)簽) Protein
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒
Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠血管生長素(ANG)試劑盒
Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMW試劑盒人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒
組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次
Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒
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