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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：人乙肝病毒pre S1蛋白/HBV pre S1 protein抗體 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15樣蛋白抗體 大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠腎小球系膜細(xì)胞 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SF188 JVM-2 (EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：101
更新時(shí)間：2024-10-29
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
淋巴管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X7099 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠淋巴管內(nèi)皮分離自淋巴管組織；淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似，但管徑較細(xì)，管壁較薄，瓣膜較多且發(fā)達(dá)，外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下，常與淺靜脈伴行，收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行，收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中，通常經(jīng)過(guò)一個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié)，從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液。主要功能是濾過(guò)淋巴液，產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。當(dāng)局部感染時(shí)，細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞（LEC）是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮，是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu)，參與維持體液平衡，調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞再循環(huán)和機(jī)體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運(yùn)輸，在疾病過(guò)程中也起著重要作用。近年研究表明，LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴(kuò)散等病理過(guò)程中起重要作用，而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能：①調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡；②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與主要病生理變化：①囊腫型淋巴管瘤；②淋巴管炎；③淋巴結(jié)核。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴管內(nèi)皮采用消化法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴管內(nèi)皮經(jīng)VEGFR3免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人組織因子(TF)試劑盒 96T/48T
人組織型纖維溶酶激活物（t-PA）試劑盒 96T/48T
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 96T/48T
人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)相關(guān)基因D（MICD）試劑盒 96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 ，英文名： TIMP-1 ELISA Kit
Human factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)試劑盒
MonkeyInsulin,INSELISAKit 猴胰島素(INS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGF-9ELISAKit大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9
細(xì)菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量試劑盒20次
rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit兔子白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
G蛋白偶聯(lián)受體108抗體
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體
TXN重組小鼠 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)
CGREF1重組人 CGREF1 蛋白 Protein
IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白
NTRK2 Protein Canine 重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白
基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)重組蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8)
IL1RAPL2 Protein Human 重組人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白
TXN重組小鼠 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
NTRK2 Protein Canine 重組狗 TrkB / NTRK2 蛋白
CGREF1重組人 CGREF1 蛋白 Protein
大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA 試劑盒
Human vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 人K1(VK1)試劑盒
HumanEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 人(EPI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplemefragme3a,C3a試劑盒人補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CaMKII激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanP-Selectin/CD62P/GMP140ELISAKit人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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