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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:713
更新時間:2024-11-05
大鼠精原細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
睪丸 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形、橢圓形 | YS-01X8238 |
細胞簡介:
大鼠精原分離自睪丸組織;睪丸呈微扁的卵圓形,表面光滑,覆蓋著鞘膜臟層;深部是質(zhì)地堅韌的白膜,在睪丸后緣增厚并進入睪丸,形成睪丸縱膈,縱膈發(fā)出許多睪丸小隔深入睪丸實質(zhì),將實質(zhì)分為睪丸小葉,數(shù)量約為100~200。每個小葉內(nèi)約有2~4條生精小管,具有產(chǎn)生精子的作用;生精小管之間的結(jié)締組織中有睪丸間質(zhì)細胞,具有產(chǎn)生雄激素的作用。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管),精直小管進入睪丸縱膈形成睪丸網(wǎng),之后睪丸網(wǎng)發(fā)出12~15條輸出小管通過睪丸后上緣進入附睪。生精小管的生精上皮是精子產(chǎn)生的地方,由生精細胞和支持細胞構(gòu)成,成人的生精小管有30~70cm長。精子的產(chǎn)生過程包括生精細胞的分化、支持細胞的作用、雄激素的調(diào)節(jié)等。生精細胞并不是一種細胞,它是多種細胞的統(tǒng)稱,包括精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞、精子細胞、精子。前者依次發(fā)育分化為后者,且依次從生精上皮的基部到管腔面排列,最終形成精子進入到管腔之中,并借助生精上皮外側(cè)的肌樣細胞的收縮作用向下一級管腔移動。精原細胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細胞經(jīng)過多次有絲分裂而形成的細胞。原始的胚細胞經(jīng)分化形成精原細胞,精原細胞經(jīng)復制形成初級精母細胞,初級精母細胞經(jīng)過減數(shù)第一次分裂后形成次級精母細胞,再經(jīng)過減數(shù)第二次分裂形成精細胞。精細胞經(jīng)過變形最終形成精子。精原細胞屬于雄性生殖細胞的早期發(fā)育階段,能不斷地進行有絲分裂,增加細胞數(shù)量,并分化為精母細胞。精原細胞貼近基膜,細胞呈圓形,核大而圓,梁色深。精原細胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力,而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中,通過精原細胞的分裂和分化,由精原細胞產(chǎn)生精母細胞,進入成熟分裂,因而通過增殖可大大增加精母細胞的數(shù)量。按理論推算,一個精原細胞通過數(shù)次細胞分裂,可形成上百個初級精母細胞。但在生精過程早期,生精細胞很易發(fā)生變性,故實際上少于這個數(shù)字。在精原細胞的增殖過程中,有一部分Ad型精原細胞不再繼續(xù)分裂,而是保留下來,成為新的精原干細胞,因此通過增殖不僅能使精原干細胞不斷得到更新,且能使精原干細胞保持一定數(shù)量,從而使精子的產(chǎn)生持續(xù)地進行下去,不會枯竭。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠精原采用混合酶多步消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠精原經(jīng)AP(堿性磷酸酶)免疫組化染色鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、GDNF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):圓形、橢圓形
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠精原體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子補體片斷3a(C3a)試劑盒 96T/48T
兔子補體蛋白4(C4)試劑盒 96T/48T
兔子表皮生長因子(EGF)試劑盒 96T/48T
兔子白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 96T/48T
小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)試劑盒 96T/48T
Rat epinephrine (EPI) ELISA Kit 大鼠(EPI)試劑盒
Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨堿性0酸酶(BALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancatecholamine,CA試劑盒人兒茶酚胺(CA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類似RIKENcDNA2610307008基因試劑盒規(guī)格:96T/48T
叉頭蛋白B1抗體
磷酸化β分泌酶抗體
MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽
UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein
MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標簽)
BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠精原細胞大鼠白三烯E4(LTE4)試劑盒 ,英文名: LTE4 ELISA Kit
Mouse beta glucosidase (beta -glucosidase) ELISA Kit 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)試劑盒
ELISA 小鼠胃泌素(mouse Gasin) 進口分裝
CLIAKitforIRF(HumanierferoegulatoryFactor)ELISAKit人干擾素調(diào)節(jié)因子
通用型番茄瘡痂病辣椒斑點病菌(Xahomonascampesispv.vesicatoria;Xcv)試劑盒20次
NGAL大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白
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