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更新時(shí)間:2024-11-05
大鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
髂動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8253 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮分離自髂動(dòng)脈組織;髂總動(dòng)脈位于機(jī)體的盆腔,大鼠的髂總動(dòng)脈有兩條,也就是臨床上左右兩條分支,它是由腹部最主要的動(dòng)脈演化而來(lái),由腹部的腹主動(dòng)脈沿著機(jī)體的脊柱方向向下進(jìn)行,到達(dá)第4腰椎后開(kāi)始分成兩支,這就是左右髂總動(dòng)脈。動(dòng)脈是介于心室與毛細(xì)血管之間的管道,它接近心室的部分,管徑大,管壁較厚。經(jīng)過(guò)反復(fù)分支,管徑逐漸變小,管壁變薄,最后形成與毛細(xì)血管構(gòu)造相似的毛細(xì)血管前小動(dòng)脈,與毛細(xì)血管相接。動(dòng)脈的管徑大小和管壁的厚薄,雖相差很大,但構(gòu)造上均有共同之處。一般均由3層膜組成,最內(nèi)層稱為內(nèi)膜,由內(nèi)皮及縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成;中間的一層稱為中膜,由環(huán)形排列的組織構(gòu)成;最外的一層叫外膜,由縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成。動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動(dòng)脈內(nèi)面的單層細(xì)胞,可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài),當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此,動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞,由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最小的微血管。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠降鈣素原(PCT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)試劑盒
HumancyclophilinB,CyPBELISAKit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CyPB)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-macrophageaibody試劑盒人抗巨噬細(xì)胞抗體(ai-macrophageAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物培養(yǎng)細(xì)胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
Humanurokinase-typeplasminogenactivator,uPA/PLAUELISAKit人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF680標(biāo)記的活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體
EPHA7重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
DRD3 receptor(dopamine D3 receptor 0.5mgDRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受體-D3抗原
ILKAP重組人 ILKAP 蛋白 Protein
ERBB2 Protein Human 重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
DRD3 receptor(dopamine D3 receptor 0.5mgDRD3 receptor(dopamine D3 receptor) 多巴胺受體-D3抗原
ERBB2 Protein Human 重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
EPHA7重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
ILKAP重組人 ILKAP 蛋白 Protein
大鼠髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白介素4(IL-4)試劑盒 ,英文名: IL-4 ELISA Kit
Mouse ierleukin 1 receptor aagonist (IL1Ra) ELISA Kit 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒
ELISA 小鼠組胺(mouse Histamine) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforiNOS(Humaninducibleniicoxidesyhase)ELISAKIT人誘導(dǎo)型合成酶
通用型甘薯黑斑病(Ceratocystisfimbriata)試劑盒20次
ELISAKitPROGR大鼠孕同受體
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