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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人胚腎細(xì)胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro 胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體 人結(jié)腸成纖維細(xì)胞 紅細(xì)胞膜蛋白條帶EPB41L5抗體 大鼠牙乳頭細(xì)胞 脂肪細(xì)胞分化因子24抗體 人胃癌組織源成纖維細(xì)胞 泛素結(jié)合酶E2F抗體

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:652

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

鼻黏膜

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8318

細(xì)胞簡介:

兔鼻黏膜成纖維分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在機(jī)體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

實驗室分離的兔鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔鼻黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔鼻黏膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

豬抗受體(A)ELISAKit   ELISA. 

中文名稱   方法   規(guī)格

豬組胺(HIS)ELISAKit   ELISA. 

豬雌二醇(E2)ELISAKit   ELISA.

0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒

Human basic fibroblast growth factor 4 (bFGF-4) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒

PorcineTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAmAC-1ELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1

血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量試劑盒20

Porcineacetylcholine,ACHELISAKit豬乙酰(ACh)試劑盒

PE標(biāo)記人CD83單克隆抗體

微管蛋白抗體

HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

PADI4 (HL-60 PAD 0.5mgPADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IVPADI 4,PAD I4 ) 關(guān)節(jié)相關(guān)基因

CDH5重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標(biāo)簽)

ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白

PADI4 (HL-60 PAD 0.5mgPADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IVPADI 4,PAD I4 ) 關(guān)節(jié)相關(guān)基因

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白

CDH5重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒 ,英文名: β-TG ELISA Kit

Rabbit soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

ELISA 小鼠核轉(zhuǎn)錄因子(mouse NF-kB )  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-16ELISAKIT大鼠白介素16

通用型馬傳染性貧血(EquineInfectiousAnemia;EIA)試劑盒20

ELISAKitANG-R-Tie2大鼠血管生成素受體Tie2


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