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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:鋅指蛋白689抗體 核糖核酸結(jié)合蛋白2抗體 K-562 [K562] (人慢性髓原白血病細(xì)胞) 大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 JIMT-1人乳腺癌細(xì)胞 大鼠脂肪干細(xì)胞 HB611 (人肝癌細(xì)胞) 小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:734

更新時(shí)間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

骨髓

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形

YS-01X8355

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔骨髓單個(gè)核分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是(mononuclear cell)單個(gè)核細(xì)胞,而不是(Monocyte)單核細(xì)胞。單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨髓單個(gè)核采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔骨髓單個(gè)核經(jīng)過檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形

傳代特性:不增殖;不傳代

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔骨髓單個(gè)核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠受體()ELISAKit   ELISA

小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)ELISAKit   ELISA

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISAKit   ELISA

小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit   ELISA

EB病毒核抗原-3A抗體

谷受體亞基δ2/GluR-δ2抗體

PLAT重組小鼠 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

蛋白Z(PROZ)重組蛋白 Recombinant Protein Z (PROZ)

EPDR1重組人 EPDR1 蛋白 Protein

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白

IL6 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白

ABCA1(ATP binding cassette transporter A1 0.5mgABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白

CCL6重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 Protein

GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白

PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒

Human visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

GuineapigGrowthhormone,GH試劑盒豚鼠生長激素(GH)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20

Mousec-fosELISAKit小鼠c-fos試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔骨髓單個(gè)核細(xì)胞大鼠皮敵菌素(DCD)試劑盒 ,英文名: DCD ELISA Kit

Mouse thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 小鼠血栓前體蛋白(TpP)試劑盒

Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 大鼠5羥色胺(5-HT)pcr檢測(cè)試劑盒分裝

CLIAKitforGp49a(Humanglycoprotein49A)ELISAKit人糖蛋白49A

細(xì)胞丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20

Ratthyroopin-releasinghormone,HELISAKit大鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒規(guī)格:96T/48T


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