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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱:小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠腎小球內(nèi)皮分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小球是腎元中的用于將血液過(guò)濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動(dòng)脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過(guò)濾速率便稱為腎小球過(guò)濾率。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一類特殊微血管類型的細(xì)胞。細(xì)胞為圓形、多角形,單層貼壁生長(zhǎng);細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球毛細(xì)血管壁腔側(cè),與血流直接接觸,是腎小球?yàn)V過(guò)膜的道屏障,可粘附細(xì)菌和白細(xì)胞,修復(fù)基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在免疫學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究?jī)r(jià)值。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮采用先機(jī)械研磨過(guò)不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體試劑盒 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體試劑盒、小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子試劑盒 小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子試劑盒、小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒、小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白試劑盒 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白試劑盒、小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuroglobin (NGB) ELISA Kit 人腦紅蛋白(NGB)試劑盒
Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISAKit 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigImmunoglobulinG,IgG試劑盒豚鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性高質(zhì)敏感比色法定量試劑盒20次
Mousecarcinoembryonicaign,CEAELISAKit小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12抗體
Notch配體Jagged 2蛋白抗體
IL33重組人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein
酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)
CCL2重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein
CD8A Protein Human 重組人 CD8A / MAL 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)
CD8A Protein Human 重組人 CD8A / MAL 蛋白
IL33重組人 IL33 / Interleukin-33 / NF-HEV 蛋白 Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CCL2重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞大鼠二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體(DMT1)試劑盒 ,英文名: DMT1 ELISA Kit
Pig sodium glucose co anspoer 1 (SGLT1) ELISA Kit 豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)試劑盒
鵝特定基因序列(Goose)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforM2-PK(MousePyruvateKinase)ELISAKit小鼠同酸激酶M2型同工酶
體液總氨基酸含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitTNF-α雞腫瘤壞死因子α
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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