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更新時(shí)間:2024-11-05
兔尿道上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
尿道 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8400 |
細(xì)胞簡介:
兔尿道上皮分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。尿道上皮細(xì)胞主要功能:①尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面,它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成;②上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸,它們具有多種防御機(jī)制來阻止病原體粘著,保持泌尿器溶解物的不滲透性;③膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α、β受體,上皮生長因子受體和纖維母細(xì)胞生長因子受體,在損傷和感染時(shí),這些受體對膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用;④能釋放許多細(xì)胞因子、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔尿道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔尿道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔尿道上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
心血管活性多肽 英文名稱: Apelin 英文縮寫: AP
轉(zhuǎn)錄因子AP-1 英文名稱: anscription Factors AP-1 英文縮寫: AP-1
0酸化AKT蛋白 英文名稱: phosphorylation AKT 英文縮寫: p-AKT
晚期糖基化終末產(chǎn)物 英文名稱: advanced glycosylation end products 英文縮寫: AGEs
B淋巴細(xì)胞成熟因子(CD269)抗體
1號染色體開放閱讀框191抗體
OSM重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein
白介素3(IL3)重組蛋白 Recombinant Interleukin 3 (IL3)
SRI重組人 SRI / Sorcin 蛋白 Protein
CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白
CLEC5A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白
Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)
CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白
FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 Protein
CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ADM重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠胰島素原(PI)ELISA pcr檢測試劑盒
Human soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒
HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 人前膠原C端肽酶(PCP)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitfor26SPSM(Human26Sproteasome)ELISAKit人26S蛋白酶體
飲料甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔尿道上皮細(xì)胞大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)試劑盒 ,英文名: HDL2 ELISA Kit
Porcine ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 豬白介素1β (IL-1β)試劑盒
埃博拉病毒(EBOV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMHB(RatMethemoglobin,MHB)ELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白
體液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量試劑盒50次
ELISAKitPCK牛0酸烯醇式同酸羧激酶