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廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠外周血單核細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
外周血 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細(xì)胞樣 | YS-01X7575 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠外周血單核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時(shí)仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較,單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周?chē)M織中,細(xì)胞體積繼續(xù)增大,直徑可達(dá)50-80μm,細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱(chēng)為組織巨噬細(xì)胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素,參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制,還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的因子。在炎癥周?chē)鷨魏思?xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂,并包圍異物。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
乳酸脫氫酶試劑盒 乳酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 乳酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:乳酸脫氫酶試劑盒、乳酸脫氫酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人組織因子途徑抑制物試劑盒 人組織因子途徑抑制物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組織因子途徑抑制物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織因子途徑抑制物試劑盒、人組織因子途徑抑制物試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人組織因子試劑盒 人組織因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組織因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織因子試劑盒、人組織因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒 人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒、人組織型纖溶酶原激活劑試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)Elisa 試劑盒 96T/48T
Human cell division cycle gene (CDC) ELISA Kit 人細(xì)胞分裂周期基因(CDC)試劑盒
Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgM,β2-GP1AbIgMELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCXC-chemokineligand16,CXCL16試劑盒人CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織ERK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
叉頭蛋白B1+B2抗體
SEDL蛋白抗體
EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
醛糖還原酶相似蛋白1(ARL1)重組蛋白 Recombinant Aldose Reductase Like Protein 1 (ARL1)
PRAP1重組人 PRAP1 / Proline-rich acidic protein 1 蛋白 Protein
IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白
NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
醛糖還原酶相似蛋白1(ARL1)重組蛋白 Recombinant Aldose Reductase Like Protein 1 (ARL1)
IL18RAP Protein Human 重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白
EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
PRAP1重組人 PRAP1 / Proline-rich acidic protein 1 蛋白 Protein
小鼠外周血單核細(xì)胞大鼠淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)試劑盒 ,英文名: Aβ1-42 ELISA Kit
Ierleukin 1 soluble receptor I (IL-1sR I) of rat ELISA Kit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒
Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAkit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCyt-CELISAKit大鼠
細(xì)胞色素P450亞酶3A4(TESTOSTERONE)活性高效液相色譜法(HPLC)定量試劑盒20次
RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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