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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:604
更新時間:2024-11-05
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔胸腺淋巴細胞
組織來源:胸腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胸腺淋巴體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
兔胸腺淋巴分離自胸腺組織;胸腺是機體的重要淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細胞分化、發(fā)育、成熟的場所。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具內(nèi)分泌機能的器官。位于胸腔前縱隔。胚胎后期及初生時,是一生中重量相對大的時期。隨年齡增長,胸腺繼續(xù)發(fā)育;此后胸腺逐漸退化,淋巴細胞減少,脂肪組織增多。胸腺的結(jié)構(gòu)表面有結(jié)締組織被膜,結(jié)締組織伸入胸腺實質(zhì)把胸腺分成許多不分隔的小葉。小葉周邊為皮質(zhì),深部為髓質(zhì)。皮質(zhì)不包圍髓質(zhì),相鄰小葉髓質(zhì)彼此銜接。皮質(zhì)主要由淋巴細胞和上皮性網(wǎng)狀細胞構(gòu)成,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)狀細胞間有密集的淋巴細胞。胸腺的淋巴細胞又稱為胸腺細胞,在皮質(zhì)淺層細胞較大,為較原始的淋巴細胞。中層為中等大小的淋巴細胞,深層為小淋巴細胞。從淺層到深層為造血干細胞增殖分化為小淋巴細胞的過程。皮質(zhì)內(nèi)還有巨噬細胞,無淋巴小結(jié)。髓質(zhì)中淋巴細胞少而稀疏,上皮性網(wǎng)狀細胞多而顯著。形態(tài)多樣,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu),為其分泌物,尚有散在的圓形的胸腺小體。
方法簡介:
實驗室分離的兔胸腺淋巴采用機械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×106cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔胸腺淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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CA7 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VII / CA7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNF重組小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein
IL22RA2 Protein Rat 重組大鼠 IL22BP / L22RA2 蛋白
CNTN4重組人 Contactin 4 / CNTN4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
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體液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量試劑盒20次
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收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
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